藕带过氧化物酶的分离纯化及酶学性质
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(湖南农业大学食品科学技术学院,湖南 长沙 410128)

作者简介:

邓波,男,湖南农业大学在读硕士研究生。

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Studies on purification and properties of peroxidase in lotus sprout
Author:
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(College of Food Science and Technology, Hunan Agricultural University, Changsha, Hunan 410128, China)

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    摘要:

    研究藕带中过氧化物酶(POD)的提取和纯化技术,以及温度、pH值和部分化学物质对POD酶活性的影响。结果表明:藕带中的过氧化物酶提取物经过40%饱和度的硫酸铵除杂、80%饱和度的硫酸铵沉淀、DEAE-52纤维素柱层析(100 mL,0.1 mol/L NaCl的pH 7.2的磷酸缓冲溶液洗脱)、葡聚糖凝胶G-75柱层析(pH 7.2的磷酸缓冲溶液洗脱)进行分离纯化后,经SDS—PAGE鉴定为单一带,其分子量约为42 kD,纯化倍数及蛋白质产率分别为32.68倍和2.11%。藕带中POD的最适温度为40 ℃,最适pH值为5.0。温度高于80 ℃基本失活,pH值小于2.0或大于8.0也基本失活。抗坏血酸对POD有明显的抑制作用;尿素、SDS、KSCN对POD具有轻微的抑制作用;草酸在低浓度时对POD具有激活作用,高于0.01 mol/L时有明显的抑制作用。

    Abstract:

    Study on peroxidase (POD) extraction and purification technology of lotus sprout, as well as temperature, pH value and part of the chemical's impact on POD enzyme activity. Peroxidase from the lotus root was purified using ammonium sulfate precipitation, DEAE-52 and G-75 column chromatography, SDS-PAGE analysis showed that the purified POD had a single polypeptide with a molecular weight is about 42 kD, the final purification fold and protein yield were 32.68 and 2.11%,respectively. The POD of the optimum temperature and pH were 40 ℃ and 5.0. At a temperature higher than 80 ℃and pH value of less than 2.0 and greater than 8.0 were basically undetectable activity. Ascorbic acid obvious inhibited POD activity, SDS and KSCN had a slight inhibitory effect on POD activity, and oxalic acid enhanced POD activity at low concentration, significantly inhibited more than 0.01 mol/L.

    参考文献
    相似文献
    引证文献
引用本文

邓波,邓放明.藕带过氧化物酶的分离纯化及酶学性质[J].食品与机械,2016,32(2):20-23.
DENGBo, DENGFangming. Studies on purification and properties of peroxidase in lotus sprout[J]. Food & Machinery,2016,32(2):20-23.

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  • 收稿日期:2015-12-07
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