花生过敏原Ara h 2.02原核表达方法条件的研究
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作者单位:

(上海大学生命科学学院,上海 200444)

作者简介:

蔡琴(1990—),女,上海大学在读硕士研究生。E-mail:caiqin08123310@163.com

通讯作者:

中图分类号:

基金项目:

国家自然科学基金青年科学基金项目(编号:31201306)


Studies on prokaryotic expression conditions of peanut allergen Ara h 2.02
Author:
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(School of Life Science, Shanghai University, Shanghai 200444, China)

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    摘要:

    将重组质粒pET-32a(+)-Ara h 2.02转化表达宿主菌Rosetta(DE3)中,经IPTG诱导表达,SDS—PAGE电泳分析,结果显示表达的蛋白大小约为38 kDa。进一步用通用His标签抗体进行Western Blotting检测,结果表明成功克隆表达了花生过敏原Ara h 2.02。为获得较多的重组蛋白Ara h 2.02,分别对IPTG浓度、摇床转速、诱导温度和时间等条件进行选择,确定最佳条件为:IPTG浓度0.3 mmol/L,摇床转速220 r/min,诱导温度37 ℃,诱导时间2 h。

    Abstract:

    The recombinant protein was induced by transforming recombinant plasmid pET-32a (+)-Ara h 2.02 into Rosetta (DE3),and identified by SDS—PAGE and Western Blotting. The results showed that the molecule weight of His-Ara h 2.02 fusion protein was about 38 kDa. At the same time, effect of IPTG concentration, shaking speed, induced temperature and time on the production of soluble recombinant protein were determined. The best conditions were as followed, the IPTG concentration was 0.3 mmol/L, the shaking speed was 220 r/min, the induction temperature was 37 ℃and the induction time was two hours, respectively.

    参考文献
    相似文献
    引证文献
引用本文

蔡琴,张文举,陈沁.花生过敏原Ara h 2.02原核表达方法条件的研究[J].食品与机械,2015,31(2):43-46,156.
CAIQin, ZHANGWenju, CHENQin. Studies on prokaryotic expression conditions of peanut allergen Ara h 2.02[J]. Food & Machinery,2015,31(2):43-46,156.

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  • 收稿日期:2014-07-24
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